AGAROSE GTG (GRAU TÉCNICO GENÉTICO)
Referência: 13-15005-05
ARMAZENAMENTO: TEMPERATURA AMBIENTE
DESCRIÇÃO:
AGAROSE GRAU TÉCNICO GENÉTICO (GTG) É UMA AGAROSE ?LOW MELTING TEMPERATURE? UTILIZADA NA SEPARAÇÃO POR ELETROFORESE DE FRAGMENTOS DE ÁCIDOS NUCLÉICOS ENTRE 100 A 23.000 PB.
ESPECIFICAÇÕES ANALÍTICAS:
TEMPERATURA DE POLIMERIZAÇÃO (GEL 4%): 26°C-30°C
TEMPERATURA DE FUSÃO (MELTING TEMPERATURE) (GEL 1,5%): ? 65°C
SENSIBILIDADE (GEL 4%): ?200 G/CM²
APLICAÇÕES:
SEPARAÇÃO DE FRAGMENTOS ACIMA DE 1.000 PB.
MANIPULAÇÃO ENZIMÁTICA DIRETA DE DNA
SEPARAÇÃO E RECUPERAÇÃO DE FRAGMENTOS DE DNA DE TAMANHOS MUITO GRANDES
CONCENTRAÇÕES DA AGAROSE-GTG SUGERIDAS:
TAMANHO | CONCENTRAÇÃO FINAL DE AGAROSE (%) | |
1X TAE BUFFER | 1X TBE BUFFER | |
500 - 25.000 | 0,75 | 0,70 |
300 ? 20.00 | 1,00 | 0,85 |
200 ? 12.000 | 1,25 | 1,00 |
150-6.000 | 1,5 | 1,25 |
100-3.000 | 1,75 | 1,50 |
50-2.000 | 2,00 | 1,75 |
MOBILIDADE DO CORANTE:
TAXA DE MIGRAÇÃO DE DNA FITA DUPLA EM RELAÇÃO AO AZUL DE BROMOFENOL E AO XILENO CIANOL EM GÉIS DE AGAROSE-GTG
1X TAE BUFFER | % | 1X TBE BUFFER | ||
XC (XILENO CIANOL) | BPB (AZUL DE BROMOFENOL) | AGAROSE | XC | BPB |
11.700 | 1.020 | 0,50 | 6.100 | 400 |
4.000 | 500 | 0,75 | 2.850 | 280 |
2.300 | 350 | 1,00 | 1.700 | 180 |
1.500 | 200 | 1,25 | 1.000 | 100 |
1.000 | 150 | 1,50 | 700 | 70 |
700 | 100 | 1,75 | 500 | 50 |
550 | 60 | 2,00 | 400 | 30 |
320 | 30 | 2,50 | 250 | 10 |
PRECAUÇÕES NO USO E NA PREPARAÇÃO:
QUANDO ESTIVER REALIZANDO A FUSÃO DA AGAROSE-GTG EM TEMPERATURAS ELEVADAS, OBSERVAR CUIDADOS PARA EVITAR QUEIMADURAS NO OPERADOR E NAS PESSOAS PRÓXIMAS DELA. UTILIZAR SEMPRE PROTEÇÃO PARA OS OLHOS QUANDO DISSOLVER A AGAROSE-GTG.
INSTRUÇÕES DE PREPARAÇÃO DO GEL DE AGAROSE EM FORNO DE MICROONDAS:
- UTILIZAR UM BECKER DE 2 A 4 VEZES MAIOR EM VOLUME DO QUE A SOLUÇÃO DE AGAROSE-GTG A SER PREPARADA,
- PESAR A QUANTIDADE DE AGAROSE-GTG EM PÓ NECESSÁRIA PARA A PREPARAÇÃO DO GEL DE INTERESSE,
- ADICIONAR O TAMPÃO DE ELETROFORESE 1X OU 0.5X E MISTURAR COM AUXILIO DE BARRA E AGITADOR MAGNÉTICOS DENTRO DE BECKER,
- RETIRAR A BARRA MAGNÉTICA, PRINCIPALMENTE, SE ESSA NÃO FOR DE TEFLON,
- É RECOMENDÁVEL DEIXAR A AGAROSE-GTG NO TAMPÃO POR 5 MIN ANTES DE COLOCAR PARA AQUECER. ESTE PROCEDIMENTO DIMINUI A TENDÊNCIA DA AGAROSE PROVOCAR PEQUENAS EXPLOSÕES DURANTE O AQUECIMENTO,
- COBRIR O BECKER COM FOLHA PLÁSTICA (WRAP PLASTIC), CUIDANDO PARA FAZER ALGUNS FUROS PARA VENTILAÇÃO E PARA NÃO EXPLODIR QUANDO FERVER,
- FERVER A AGAROSE POR APROXIMADAMENTE UM MINUTO E, RETIRAR COM MUITO CUIDADO DA FONTE DE CALOR UTILIZANDO LUVAS DE PROTEÇÃO,
- DEIXAR ESFRIAR A SOLUÇÃO ENTRE 50°C A 60°C ANTES DE COLOCAR NO SUPORTE DE ACRÍLICO,
- ESVAZIAR O CONTEÚDO DENTRO DE UM SUPORTE DE PLÁSTICO COM O PENTE E DEIXAR POLIMERIZAR.
OBS: ESTE PRODUTO É UTILIZADO ESTRITAMENTE EM PESQUISA CIENTÍFICA, NÃO RECOMENDADO PARA O USO EM DIAGNÓSTICO CLÍNICO OU TERAPÊUTICO
